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  • 表面抗体取向偶联聚苯乙烯微球ps的方法和原理/抗体包被荧光磁珠/中性亲和素包被的微球/链霉亲和素包被的磁珠 纳米探针已经在体外诊断领域得到了广泛的应用。然而在一般方法中,抗体通常是方向随机地吸附或偶联在...

    表面抗体取向偶联聚苯乙烯微球ps的方法和原理/抗体包被荧光磁珠/中性亲和素包被的微球/链霉亲和素包被的磁珠

    纳米探针已经在体外诊断领域得到了广泛的应用。然而在一般方法中,抗体通常是方向随机地吸附或偶联在纳米颗粒载体上,其抗原识别位点容易被占用或受到空间位阻的影响,导致纳米探针对抗原的特异性结合能力降低。为了改善抗体取向,使更多抗原结合位点充分暴露,研究者们提出了一系列新方法,代表性的技术包括利用抗体特殊位点(如Fc端寡糖链、铰链区二硫键)、引入夹层蛋白(如蛋白A、蛋白G、蛋白L)、分子印迹、抗体融合His-tag等。这些方法通常操作步骤比较复杂,成本较高,或需要对抗体改性,或需要引入新的组分,不易向实际应用中转化。

    开发了一种简单的抗体取向结合在聚苯乙烯纳米颗粒表面的方法,即基于大家熟悉的EDC/Sulfo-NHS交联法,调整抗体和载体纳米颗粒的反应pH,并将这一条件下制备的探针用于心肌肌钙蛋白I 侧向免疫层析检测。结果表明,抗体结合量和结合取向以及抗原检测灵敏度都得到了显著提高。虽然调节pH值是优化抗体结合常用的手段,但本文次深入探讨了该手段增强抗体取向的机制,并揭示了抗体密度、电荷分布和亲疏水性的重要性,物理吸附和化学偶联速度以及其他因素对抗体取向的影响。当pH降至略低于抗体等电点时,一方面,抗体的电荷分布和亲疏水区域分布更有利于其以“tail-on”取向;另一方面,抗体和载体间化学交联速度减缓,提供了更长的窗口时间,使抗体在纳米颗粒表面微环境的影响下更充分地调节取向。该方法提高抗体结合量的意义还在于,当抗体结合密度足够高时,抗体能够垂直紧密排列在载体表面,使探针结构更加有序和稳定。

    图1 荧光免疫层析测定cTnI,探针制备时抗体投料量: (A) 50μg; (B) 200μg;(C) 抗体的三个维度尺寸

    图2 (A) IgG1小鼠单克隆抗体(1IGY)的三维晶体结构。左上角:前视图;右上角:侧视图;左下角:俯视图;右下角:底部视图。碱性和酸性氨基酸基团分别用蓝色和红色标记。(B) Fab 2和Fc片段上碱性和酸性氨基酸的数量。(C)(Fab)2和Fc片段在不同pH下的净电荷量,忽略保守的糖链,电荷分布与pI的实测值不完全一致。

    图3 pH对抗体取向偶联的影响及机制

    这一简单、实用的方法适用于优化各种IgG型抗体的取向。充分探讨在化学交联过程中影响抗体取向的因素,也有助于更好地指导我们调节实验条件,从而构建更高性能的探针,从而实现高性能的体外诊断试剂开发。

    名  称

    镍离子琼脂糖凝胶4FF/6FF

    镍离子琼脂糖凝胶4FF/6FF

    镍离子琼脂糖凝胶4FF/6FF

    耐碱Protein A 琼脂糖凝胶4FF

    耐碱Protein A 琼脂糖凝胶4FF

    耐碱Protein A 琼脂糖凝胶4FF

    耐碱Protein A 琼脂糖凝胶4FF

    Protein A 琼脂糖凝胶4FF

    Protein A 琼脂糖凝胶4FF

    Protein A 琼脂糖凝胶4FF

    Protein A 琼脂糖凝胶4B

    Protein A 琼脂糖凝胶4B

    Protein A 琼脂糖凝胶4B

    Protein G 琼脂糖凝胶4FF

    Protein G 琼脂糖凝胶4FF

    Protein G 琼脂糖凝胶4FF

    Protein G 琼脂糖凝胶4B

    Protein G 琼脂糖凝胶4B

    Protein G 琼脂糖凝胶4B

     

    弱阴离子交换介质(DEAE)

    弱阳离子交换介质(CM)

    强阴离子交换介质(Q)

    强阳离子交换介质(SP)

    琼脂糖亲和介质(肝素)

    琼脂糖亲和介质(谷胱甘肽)

    琼脂糖亲和介质(Ni)

    琼脂糖亲和介质(蓝胶)

    琼脂糖亲和介质(Protein A)

    疏水层析介质(苯基琼脂糖)

    疏水层析介质(丁基琼脂糖)

    疏水层析介质(丁基硫琼脂糖)

    环氧活化琼脂糖凝胶介质

    PST介质(30微米, 疏水)

    PHEMA介质(30微米, 亲水)

     

     

    表面功能化聚苯乙烯微球

    羧基化聚苯乙烯微球

    氨基化聚苯乙烯微球

    羧基功能化马来酸酉干(MA)聚苯乙烯微球

    羧基功能化丙烯酸(AA)聚苯乙烯微球

    羧基功能化甲基丙烯酸(MAA)聚苯乙烯微球

    羧基功能化甲基丙烯酸甲酯(MMA)聚苯乙烯微球

    酰基化聚苯乙烯微球

    酞胺化聚苯乙烯微球

    酸化功能化聚苯乙烯微球

    "单分散二氧化硅微球 单分散羧基二氧化硅微球"

    单分散氨基二氧化硅微球

    "单分散聚苯乙烯微球 聚苯乙烯微球"

    交联聚苯乙烯微球

    氨基聚苯乙烯微球

    交联氨基聚苯乙烯微球

    羧基聚苯乙烯微球

    交联羧基聚苯乙烯微球

    "单分散荧光微球 红色荧光微球"

    橙色荧光微球

    绿色荧光微球

    氨基红色荧光微球

    氨基橙色荧光微球

    氨基绿色荧光微球

    羧基红色荧光微球

    羧基橙色荧光微球

    羧基绿色荧光微球

    wyf 04.13

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  • 一、总结性表格 从开始提审App到每一次被打回,到最终通过审核过程的记录,...iOS代码混淆请看我的另一篇博客《ZFJObsLib-iOS代码混淆工具-马甲混淆工具(Python脚本混淆iOS工程)》 有的是公司为了引流,把主AP...

    一、总结性表格

    从开始提审App到每一次被打回,到最终通过审核过程的记录,包括App内容、打回原因、打回时间、修改内容、重提时间,上架时间,下次提交后的反馈等。

    一份代码可以混淆以后上多次、可以在不同的账号上进行打包上架,降低上架成本;

    iOS代码混淆请看我的另一篇博客《ZFJObsLib-iOS代码混淆工具-马甲包混淆工具(Python脚本混淆iOS工程)

    有的是公司为了引流,把主APP的部分代码拿出来上架新的APP即主APP的马甲包,但是如果不混淆也是肯定会被拒的,所以混淆很重要!

    有的马甲包是有AB面的,在网络开关处理上也要恰当好处,不要那么直白!

    二、素材方面

    2.1 图片的内容和尺度要符合全年龄段

    以游戏为例,若APP设置年龄为17岁+,图片有些血腥或暴露,从年龄上讲这是正常的;但苹果认为,即使是4岁的小孩子也能看到这些截图、icon、文本,所以也会被打回。

    2.2 名称和副标题

    APP名称最多是30个字符,副标题同理,但建议名称和副标题都在14个字以内,一来太长了影响阅读,二来容易被认为是堆砌关键词。

    2.3 关键词

    目前可以使用中国、英国英文、美国英文、澳洲英文、加拿大英文共5个地区做本地化,由苹果自己来分词。关键词不要重复,且自己认为重要的关键词放在每版的开头,中文版关键词最重要。

    2.4 版权

    如果涉及到版权和版号,最好一开始就向苹果提供授权证明、资质证明,节约时间避免麻烦。

    三、功能方面

    3.1 新手引导

    苹果审核时不看新手引导,而是需要一个能够体验所有功能的高级账号,若有新手引导会被直接打回。游戏要特别注意。

    3.2 热更新

    发现有热更新会被打回或下架,违反了苹果的安全协议。

    3.3 游客和隐私协议

    当APP需要注册并获取手机号、邮箱、姓名、身份证等信息,苹果认为这是隐私信息,会要求开发者提供游客模式。

    从2018年10月3日起,所有新APP和版本更新都需要包括隐私保护协议,并且,开发者必须同时上传APP到APP Store和苹果旗下的TestFlight移动应用服务测试软件。开发者若想修改隐私保护中的任何内容,都必须上传新版APP。

    3.4 IDFA

    IDFA是广告主识别码,让用户识别广告。苹果把设备ID、MAC地址当成用户隐私,因此IDFA就用来识别用户。若APP要调用IDFA做用户识别,提审的时候需要选择调用IDFA,并说明调用目的。

    3.4 IPV6

    只要苹果审核人员连不上网或者联网慢,都会归咎于这个原因。

    处理办法:

    1. 检查服务器连接是否正常,重新提交时将截图或拍下视频放附件里;
    2. 或者向苹果申诉,回复苹果我们的网络有问题,建议更换时间尝试。

    如果 App本身有问题,例如不兼容 IPv6,最好的办法是让App兼容 IPv6 或通过升级服务器来支持IPv6

    四、高危因素

    4.1 提审时必须避开应用内福利

    应用内福利包括但不限于:兑换码、激活码、CDK、邀请码、礼包码。苹果要求每个用户使用新APP时都有基本的公平,若部分人有部分人没有,就算是不公平。若一定要有福利,那就等上架后再打开。

    4.2 评论

    提审时不要引导用户去刷好评,更不要用有偿的方式去引导刷好评。即使是上架后也不能有偿引导用户刷好评,分分钟会被下架。

    4.3 月卡

    苹果允许做月卡,但形式是非自动续订型的订阅方式,用户从购买之日起可以连续领取30日。而有部分开发者则是要先打开APP,在APP内由程序控制,用户连续登录30日领取。

    4.4 第三方支付

    第三方支付如微信、QQ钱包、支付宝、银联等,这是苹果决不允许的,一旦发现就会下架APP,因为苹果要抽成30%流水。

    五、过审秘诀

    5.1 初审图

    苹果将APP分为初审包、更新包。初审时,APP宣传图对APP的美化程度越低,与APP实际情况越贴近,越容易过审。

    更新时对稍微宽松,可使用适当美化过的APP宣传图。

    5.2 测试账号

    苹果讨厌新手引导和重视注册隐私,要提供一个完整使用所有功能的测试账号。若不希望苹果看见某些功能,除了技术上要限制这个账号看不见这些内容,也应该对这些内容在过审时先隐藏,上架后再打开。

    六、审核时长

    初审包:游戏需要1-4周,APP需要1-2周,也要看账号。若同一个账号里发布的APP多,跟苹果有良好持续的沟通,APP有稳定的更新周期且无大错误,苹果一般会列为优良开发者,缩短审核时间。

    更新包:APP需要2-5天,游戏需要3-5天。

    加急审核:提交后在24小时内发布,加急理由需要被苹果认可(尽量用英文写邮件)

    七、流水分成

    理论上,开发者可以拿70%的流水。实际上,到手流水可能会略少。

    对于可以订阅的App,苹果2016年新政规定,第一年收取30%,从第二年起降至15%,让开发者盈利更多。

    7.1 代扣税

    7.2 钻汇率空子

    用户可以下载APP后,将账号转移到汇率波动国,再进行支付。

    解决办法:

    在用户支付时获取货币符号,若货币符合与APP上架国家不同时,拒绝其支付。

    7.3 坏账

    当用户用信用卡支付后,向银行挂失,银行就截留资金,苹果收不到钱。

    7.4 国际汇率波动

    苹果不会实时计算汇率,若结账时碰上汇率波动导致人民币对美元贬值,开发者收到的钱就少了。

    八、惩罚机制

    8.1 延迟审核

    这个时候,苹果一般已经发现隐藏内容、做马甲包,或者包含了苹果不允许的内容。

    对于游戏而言,这个账号也等于废了。

    8.2 清榜

    初次刷榜被发现的惩罚方式,一般生效50-70天。

    8.3 下架

    涉及版权或资质纠纷、第三方支付、刷好评被警告后继续刷,都会被下架。

    8.4 封号

    出事APP账号及其关联的所有账号统统封禁,包括但不限于:

    1. 同一家企业邮箱注册的账号
    2. 显示同一公司名的账号
    3. 联系人信息为同一人
    4. 绑定同一信用卡的
    5. 发布同一款APP的不同账号(马甲包)

    同一设备登录的账号可能也会封禁,最好每次提交马甲包都用虚拟机。

    九、运营篇

    9.1 后续功能放在更新包

    初审时间长,做完APP的主要功能打包进初审包APP就提交,缩短审核时长,后续功能都放在更新包,审核宽松些。

    9.2 审核服

    游戏开服、更新时会有玩家互动,若不希望苹果看见,就专门搭建一个审核服,让苹果审核人员与真实用户分别进入不同的服务器,完全不能互通。

    9.3 编辑推荐

    9.3.1 已有同类APP

    那就说明自己的APP比同类APP强在哪里,能否为苹果挣钱,挣更多钱。

    9.3.2 投其所好

    每次苹果新品发布会着重提到的新技术,新技能,比如VR,自家APP可以适配兼容这些技术功能。

    9.3.3 能怎样为苹果挣钱

    让苹果知道,你的APP能为苹果带来多少好处

    9.3.4 讲故事

    在苹果自荐页面中,以英文写自己公司或APP的故事

    9.4 国家调整

    苹果先选择发布国家后审核,过审可以修改发布国家和上线价格。因此可以先选择和主包不同的国家提审,过审后再改回目标国家。

    但是必须要注意:

    1. 主包或马甲包中任一个勾选了全球,那么,后续提交的马甲包(马甲包新版本)不管勾选哪个国家,都会有相同的APP存在;
    2. 苹果审核人员也会看你的本地化素材、商品描述等信息判断,为了过审而选择的国家本地化一定要做好;
    3. 一定要修改APP的代码,加入一些垃圾代码块;

     

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  • export jar包被第三方Call Demo
  • myeclipse包被分开了

    2013-03-18 13:27:45
    上几天很苦恼,因为myeclipse的包被按照层次分开了,但是很不习惯,所以就上网找了找解决方法,终于找到了,特此分享一下: windows----->navigation----->show view menu----->package presentation------->flat ...

               上几天很苦恼,因为myeclipse的包被按照层次分开了,但是很不习惯,所以就上网找了找解决方法,终于找到了,特此分享一下:

    windows----->navigation----->show view menu----->package presentation------->flat

    相反

    windows----->navigation----->show view menu----->package presentation------->Hierarchical

     

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  • 今天小编就为大家分享一篇go 下载非标准库(部份包被墙了)到本地使用的方法,具有很好的参考价值,希望对大家有所帮助。一起跟随小编过来看看吧
  • socket tcp如何防止多次send的包被合成一个(粘包)发送.zip
  • 收到公司代码检测发来的消息,说是项目中引入的某个jar版本过低存在安全问题,需要升级,但是,笔者硬是找了半天都没有找到是哪个地方引入了这个jar。 现在问题就是需要找到是哪里引入的这个,并将其排除。 ...

    背景

    收到公司代码检测发来的消息,说是项目中引入的某个jar包版本过低存在安全问题,需要升级,但是,笔者硬是找了半天都没有找到是哪个地方引入了这个jar。
    在这里插入图片描述
    现在问题就是需要找到是哪里引入的这个包,并将其排除。

    方法一:mvn dependency:tree命令

    # 打开cmd
    # 切换到代码库的主目录中
    # 执行如下命令
    mvn dependency:tree > C:\Users\wayss000\Desktop\maven.txt
    # 该命令作用是讲maven的依赖trree打印到maven.txt文件中
    # 值得注意的是,如果你的代码相互之间有依赖,则需要先执行mvn install
    # 最后,在maven.txt中Ctrl + F 搜索要寻找的jar名
    

    这里需要注意的是,如果mvn dependency执行不了时,可以检查下是否在引入了dependency plugin.

    方法二:用idea图形界面操作

    如图,
    在这里插入图片描述

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  • 在使用此时,会导入失败,因为这不是go标准库中,但是由于域名被墙了所以翻墙可以下载此,放入你的GOPATH路径下的 “golang.org/x/net”这个目录 具体步骤 下载net(也可以是你需要的非标准库) git ...

空空如也

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