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    2021-03-11 13:13:49
    《java实验步骤》由会员分享,可在线阅读,更多相关《java实验步骤(59页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。1、实验二 java基本语法1. 分析并通过程序验证以下表达式:(1) short s = 33L;(2) int i = 33L;(3) longl = ...

    《java实验步骤》由会员分享,可在线阅读,更多相关《java实验步骤(59页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。

    1、实验二 java基本语法1. 分析并通过程序验证以下表达式:(1) short s = 33L;(2) int i = 33L;(3) longl = 33L;(4) float f = 33L;(5) double d = 33L;2. 首先分析判断能否编译成功,并在表2-1-1中填写预测结果:表2-1-1 实验结果3. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果,在上表中填写验证结果。根据记录的实验结果回答以下问题: 哪些表达式能编译成功?为什么? 哪些表达式不能编译成功?为什么?如何修改表达式才能编译成功?定义两个变量a和b为:(1) int a = 10;。

    2、(2) int b = 3;一. 算术运算符操作练习1. 求变量a和b的和、差、乘积、商和余数,并在下表中填写预测结果:表2-2-1实验结果2. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果,在上表中填写验证结果。二. 运算符优先级操作练习1. 分析表达式,并在下表中填写预测结果,且比较运算符优先关系。表2-2-2实验结果2. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果,在上表中填写验证结果。 根据记录的预测结果和验证结果,分析+和+的运算优先级关系。三. 位运算符操作练习1. 求出a与b的各种位运算,并在下表中填写预测结果:表2-2-。

    3、3 实验结果2. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果,在上表中填写验证结果。 重新定义变量a的值,令a=-10,再次验证“ab”和“ab”的结果,并分析“ab”与“ab”的区别。实验三 java流程控制一. if语句练习1. 编写程序实现判断输入的年份是否为闰年。提示闰年:如果一个年份能被4整除并且不能被100整除,或者能被400整除的就是闰年。2. 源代码如下:3. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果,并在下表中填写验证结果,是闰年填“Y”,不是闰年填“N”。表3-1-1 实验结果 如何将上述代码中的(1)至(6)代。

    4、码改写为一条if语句实现。二. switch语句练习1. 编写程序实现学生成绩等级划分,输入考试成绩等级,程序会相应输出相应的百分制分数段,要求需使用switch语句。提示if语句和switch语句结合使用。等级划分如表3-1-2所示:表3-1-2 学生成绩等级划分2. 源代码如下:3. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果,并输入测试case,对照等级划分表验证程序结果。三. for语句练习1. 编写程序,输出1到100之间,所有可以被3整除又可以被7整除的数。2. 源代码如下:3. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果。

    5、。 分别使用while和do_while循环语句改写本程序,并上机运行。四. 程序流程控制语句综合应用根据以下要求,运用程序流程控制语句打印“田”字。程序要求:根据输入“田”字的长度进行打印输入,长度须为奇数,并且大于等于5,否则予以提示。运行效果图如下:提示输入整型变量的语句如下代码所示:一. 二维数组练习1. 假定某个宾馆有三层楼,第一层有4个房间,第二层有3个房间,第三层有5个房间。某一天客人的住宿情况如表3-2-1所示:表3-2-1 某天客人住宿情况注null表示该房间没有人住宿,在输出房间住宿情况时,没有人住宿直接输出null。用两维数组来存储各个房间的客人信息,并输出结果如:2. 。

    6、源代码如下:3. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果。 分析上述代码中二维数组的初始化工作,能否用其他方式实现等价的二维数组初始化工作呢?如果可以,请编写初始化部分的代码。二. 方法返回类型是数组的形式1. 编写一个方法,获得一个字符串的所有字符,并且利用增强的for循环打印输出,方法定义为:2. 源代码如下:3. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果。 如果不用增强的for循环,用普通的循环如何输出?三. 方法参数是以数组的形式传入1. 把数组作为方法的参数,循环输入“妈”、“妈”、“我”、“爱”、“你”,然后输出“妈。

    7、妈我爱你”。2. 源代码如下:3. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果。实验四 面向对象程序设计11. 创建一个圆类,成员变量有半径radius和圆周率pi,提供计算圆面积的方法,并在main方法中创建圆类的对象,调用其计算面积的方法进行测试。2. 源代码如下:3. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果。 试述程序中两个类的各自作用。 类Circle都封装了什么?求圆面积的初始数据是通过哪个方法实现的?请修改程序采用构造函数的方法初始化数据。 类Circle是如何声明的?在类中都声明了什么?在主函数中是如何创建Circl。

    8、e类对象的?一. 静态变量和实例变量练习1. 创建一个类,类名为StaticVariableTest,包含static变量和实例变量,类型为int型,在main方法中分别调用这2个变量并且输出结果。2. 部分源代码如下:3. 将上述代码中的main方法补充完整后,编译运行代码,查看程序执行结果。 根据完善后的源码,分析调用静态变量和实例变量有什么不同?二. 静态方法和实例方法练习1. 创建一个类,类名为StaticMethodTest,包含一个静态方法和一个实例方法,在main方法中分别调用这个两个方法进行测试。2. 部分源代码如下:3. 将上述代码中的main函数补充完整,编译运行代码,查看。

    9、程序执行结果。 根据完善后的源码,分析如何调用静态方法和实例方法?一. 访问修饰符练习1. 创建一个Person类,在该类中用不同的访问修饰符设立不同的person属性,再创建一个PersonTest类,包括main方法,在此类中分别访问Person类中各个属性。2. 源代码如下:3. 先填写下面的表格,在预测结果中,如果能打印输出,填写程序输出结果,否则填“N”。 记录程序运行结果。表4-3-1 预测和验证结果4. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码。在上表中填写程序验证结果。 访问private变量时,编译会出现什么问题,为什么? 通过什么方式能访问private变量?。

    10、编程实现访问Person类中的private变量。二. 方法重载练习1. 给出一个OverloadTest类,并定义了一个amethod()方法,分析A)、B)、C)、D)和E)五个方法能否正确编译;2. 源代码如下:3. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果。 根据程序执行结果分析类中A)、B)、C)、D)和E)五个方法哪些能编译,哪些不能编译,为什么?实验五 面向对象程序设计2一. 继承类的访问修饰符练习1. 定义一个父类,有不同访问级别的成员变量和方法;2. 源代码如下:3. 再定义一个子类,继承上面的父类,访问父类的成员变量和成员方法。4. 子类源代。

    11、码如下:5. 分析上面main方法的每一步中,哪些成员变量和方法可以访问,哪些不能访问?填写下面表格中的预测结果,可以访问的填“Y”,不可以访问的填“N”。表5-1-1 实验结果6. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果,并填写表5-1-1中的验证结果。二. 成员变量的隐藏和方法覆盖练习1. 以下程序具有继承、成员的覆盖与隐藏的概念。2. 源代码如下:3. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果。 子类Son中隐藏了父类Father哪个变量?覆盖了哪个方法? 根据上述程序,分析方法重载与方法覆盖的区别。1. 下面源代码演示了。

    12、多态的各种特性。2. 源代码如下:3. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果。 分析上述代码中的who.var和who.staticVar、who.method()和who.staticMethod()的输出结果有什么不同?为什么存在这种现象? 分析以下代码,编译时会有什么问题?为什么? 分析以上代码,如何能让who访问Sub类的成员? 分析以下代码,运行会有什么问题?为什么?一. 接口相关练习1. 定义一个rec_Area_Peri接口,里面有两个方法getArea()和getPerimeter(),分别表示“计算面积”和“计算周长”;再定义一个Recta。

    13、ngle类,实现接口rec_Area_Peri。2. 源代码如下:3. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果。 在实现类Rectangle中注释掉一个方法后进行编译,看发生了什么?为什么? 在实现类Rectangle中将各实现方法前的public修饰符去掉再进行编译,看发生了什么?为什么? 将接口rec_Area_Peri中定义的两个方法前加上abstract修饰符再编译,看对程序有影响否?为什么? 将接口rec_Area_Peri中定义的两个方法拆分定义成两个接口,即每个接口只定义一个方法,程序将如何修改?二. 包的相关练习1. 创建两个java文件,一个。

    14、是mypack.java文件,定义两个类classA和classB,类修饰符为默认。另一个是主类文件TestPackage.java,在该类中使用classA和classB。两个java文件都在package1包中。2. mypack.java源代码如下:3. TestPackage.java源代码如下:4. 使用Eclipse开发工具,编写上述代码,编译运行代码,查看程序执行结果。 将主类文件TestPackage.java封装在另一个包mypackage2,再进行编译,看编译结果提示什么结果? 以上条件不变,在主类class TestPackage加进import mypackage1.*语句,再编译,看是什么编译错误? 将类classA和classB修饰为public再编译,看发生了什么?为什么?将类cla。

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  • MTT 实验步骤

    千次阅读 2019-11-25 16:03:00
    MTT 实验步骤 MTT: 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,汉语化学名为 3-(4, 5-二甲基噻唑-2)-2, 5- 二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。 原理: MTT比色法,是一种检测细胞存活...

    MTT 实验步骤

    MTT: 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide汉语化学名为 3-(4, 5-二甲基噻唑-2)-2, 5- 二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。

    • 原理:

    MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒( Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。

    MTT 是一种接受氢离子的染料,可作用于活细胞线粒体中的呼吸链,在琥珀酸脱氢酶细胞色素 C 的作用下,生成蓝色的 formazan 结晶。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490 nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

    • 细胞存活率细胞密度:每孔5000-10000个,每孔100 uL,即(5~10)×104/mL
    • 保证实验结果的线性,MTT 吸光度最好在0-0.8 范围内,(阴性组在0.8-1.2, 加药组在0-0.7
    • 调零孔(培养基、MTT 、二甲基亚砜)对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜),扣除材料背景(细胞、不同浓度的药物、培养液、二甲基亚砜)。
    1. 铺板:
    1. 消化细胞,吹散,取100 uL+300 uL PBS (稀释4倍)进行细胞计数,得到*×104/mL算出稀释倍数,配成8 mL细胞悬液1mL枪混匀。
    2. 每个孔100 uL,从上到下,从左到右加入细胞悬液。
    3. 边缘孔用PBS填充,放至培养箱。
    1. 加材料

    材料储存:j干粉状,用时直接称量所需要的质量

              k离心完的沉淀,(平行做一管称质量),分散到20 ul H2O/PBS到1 mL 所需浓度

              l离心完的沉淀, 用时直接分散到DMEM(+)使用。

              m离心完的沉淀, 用时直接分散到DMEM(-)使用,适用于材料在有血清的培养基中不稳定的,加到细胞培养板中4h后换有血清的DMEM(+)

    材料母液浓度:离心完的沉淀,一管,分散到250 uL H2O,得浓度6400 ug/mL,,超声均匀, 取30 uL配成160 ug/mL 1200 uL。(材料大浓度用含血清的培养基稀释40倍,含水量2.5%)

    1. 配制不同浓度的材料(12.5, 25, 50, 100, 200, 400, 800 ug/mL或者2.5, 5, 10, 20, 40, 80, 160 ug/mL),每种浓度最终至少600 uL,由160 ug/mL材料 1200 uL逐级稀释得到。
    2. 泵吸走培养基,吸完一列加一列材料。最后吸走对照组培养基。
    3. 每孔加100 uL,一列同浓度,从左到右浓度由低到高,对照组加100 uL DMEM(+)。
    1. 加MTT
    1. 配制5 mg/mL MTT(溶于PBS),配制10 mL过滤后(0.22 um滤头)分装到EP管(每个1mL),避光储存到-20℃。每孔加入10 uL, 孵育4 h, MTT对光敏感,需用锡箔纸包住,对菌敏感。孵育4h。

    备:如果材料有影响,泵吸去培养基,排枪加PBS 100 uL洗去材料,洗3次,泵吸去PBS,将MTT稀释10倍(700 uL+6300 uL DMEM(-)),每孔加入100 uL, 孵育4h。MTT用完放回(剩约300 uL, 集齐3管可一次使用)

    1. 加DMSO
    1. 用泵吸去MTT,用排枪在每孔加入150 uL DMSO,摇床振荡10 min, 振荡速度为50,20 min,测490 nm, 570 nm吸光度值。

    材料浓度范围一定要宽,治疗效果,细胞密度一定要低,2000个/孔,对照组吸光度0.60

     

     

    • 布板
    • 细胞计数:

    细胞数/mL=4个大格细胞总数/4×104×稀释倍数

    操作步骤:

    1.取100 ul细胞悬液与300 ul PBS混合均匀于1.5 ml离心管中。

    2.盖上盖玻片,取10ul混合液自盖玻片边缘加入,于10倍生物显微镜下观察。

    3.分别计数四个大方格,得到细胞总数,再除以4,乘以稀释倍数(本实验为4),最后乘以104,即为每mL细胞悬液中细胞数。若细胞位于线上,只记左侧和上方的

     

    注:

    1.细胞数/ml=4大格细胞总数×稀释倍数×104/4;每一大格的体积为=0.1cm×0.1cm×0.01cm=10-4ml

    2.计数板计数时,最适细胞浓度为(50~100)×104个/mL,此范围外计数误差偏大。
    3.高浓度细胞悬液,可取出部分作稀释或连续稀释后计数。

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  • RIP实验步骤: 一、裂解样本 1.细胞生长约90%覆盖度,细胞计数,收件约1× 10^7细胞; 2.1000 ×g,4 °C离心5min,弃上清; 3.用1×预冷PBS洗两遍,弃上清; 4.用等体积的1×PLB裂解液重悬细胞,轻轻吹散,冰...

     RIP 技术用于定位体内的RNA-蛋白质相互作用。将所关注的RNA结合蛋白(RBP)与其结合的RNA一起进行免疫沉淀,鉴定结合转录RNA(mRNA、非编码 RNA或病毒RNA)。可以通过实时PCR、微阵列或测序检测。

    RIP实验步骤:

    一、裂解样本

    1. 细胞生长约90%覆盖度,细胞计数,收件约1× 10 ^7细胞

    2. 1000 ×g,4 °C离心5min,弃上清;

    3. 用1× 预冷PBS洗两遍,弃上清;

    4. 用等体积的1×PLB裂解液重悬细胞,轻轻吹散,冰浴5min;

    5. −80 °C冻存,样品也可以在−80 °C放置数月。

    二、磁珠-抗体复合物制备

    1.    振荡混匀Protein A/G琼脂糖珠,根据样本数各吸取40ul到1.5mL离心管中;用0.5ml NT-2洗涤两遍。

    2.    用100ul NT-2重悬Protein A/G琼脂糖珠,并加入5ug目的抗体或IgG抗体。室温翻转孵育1h.

    3.  4℃, 4000转离心1min,去上清。

    4.    用1ml NT-2 重悬Protein A/G与抗体复合物4℃ ,4000转离心1min,去上清。重复该步骤5次,共洗涤6次。

    5.    用900ul NET-2重悬Protein A/G与抗体复合物。

    、蛋白与RNA复合物沉淀

    1.    冰上解冻细胞裂解物,17000*g 4 °C离心10min。取10ul裂解物上清作为input,于-80℃冻存,最后与RIP产物一起提取RNA。吸取100ul上清液到900ul的Protein A/G与抗体复合物中,4 °C翻转孵育过夜;

           2.    孵育完成后4℃, 4000转离心1min,去上清;

           3.   用1mL预冷的NT-2重悬Protein A/G复合物;并用涡旋仪震荡15s。4℃, 4000转离心1min,去上清;

            4.  重复上步骤5遍,共洗涤6遍(如果出现IGG组背景比较高的情况,可多洗涤几遍)

           5.  用150ul Proteinase K buffer重悬Protein A/G复合物;另外input样本中加入107ulNT-2,15ul 10%的SDS及18ul Proteinase K。于55 °C孵育30min。

           6.   加入1ml trizol 进行RNA提取(并用6ug糖原沉淀RNA)。

           7.   用等体积的RNA进行反转录及qpcr检测(如果10%input的RNA浓度过高,可稀释10至1%input 进行反转录)

    (由于RNA提取与qPCR分析为常规使用操作,在此次就不再细讲,有需要的详细了解的朋友可以私聊讨论哈)

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