精华内容
下载资源
问答
  • 2022-04-26 20:14:28

    为了了解这两个概念,我们先了解一些基本的生物学的概念
    1、转录
        转录是生物细胞体内产生蛋白质的过程,DNA解链,然后匹配对应的mRNA,mRNA的不同种类对应不同的蛋白质。
    2、转录组
        转录组广义上来讲,是指转录过程中出现的所有RNA,狭义上来讲,特指mRNA
    3、转录组测序
        就是记录转录组的过程
    4、单细胞转录组测序(single cell RNA-sequencing)
        对单个细胞进行的转录组测序
    5、空间转录组学(Spatial Transcriptomics)
        传统的转录测序技术无法提供细胞的空间位置信息,空间转录组学的诞生解决了这一问题
     

    更多相关内容
  • RNAseq:转录组学项目 该存储库包含一些不同的RNAseq项目 卡汉 此文件夹包含对几天成年果蝇Drosophila melanogaster的全身热(37)和冷(4)震荡进行的分析,以进行针对EPSCoR ThermoFly Group for Frontiers论文...
  • an吟:时程转录组学分析
  • CytoSPACE:scRNA-seq数据到空间转录组学数据的最佳映射 CytoSPACE是一种新颖的计算策略,用于在空间转录组(ST)测量可能包含多个细胞的贡献的情况下,将单细胞转录组分配给原位空间转录组数据。 我们的方法通过...
  • 全球转录组学分析和南极绿色藻类衣藻(Chlamydomonas sp。)中的热激蛋白。 UWO241 差异基因表达(DEG),热图和维恩 使用HISAT2将数十亿个UWO241 RNA-seq读图定位到绿藻组装的基因组(参考基因组:GCA_016618255....
  • 蛋白质组学与转录组学联合分析

    千次阅读 2021-01-20 11:36:55
    简介 蛋白质是生物体最终的功能执行着,其含量随着生物体的生长、环境应激反应、疾病发生发展的过程不断变化,因此,对...蛋白质组学与转录组学联合分析, 就是通过对转录组数据和和蛋白质组数据进行联合分析,挖掘mRNA

    简介

    蛋白质是生物体最终的功能执行着,其含量随着生物体的生长、环境应激反应、疾病发生发展的过程不断变化,因此,对蛋白质的解析意义重大。转录组是连接基因组和蛋白质组的中间模块,从DNA转录成mRNA,再翻译成蛋白质的过程中,涉及到一整套精细的表达调控机制,如转录调控,转录后调控,翻译调控,翻译后调控等。研究表明转录组和蛋白质组的相关系数并不高,表明在这个过程中,翻译和翻译后调控对蛋白质的表达具有非常重要的调控作用。

    蛋白质组学与转录组学联合分析, 就是通过对转录组数据和和蛋白质组数据进行联合分析,挖掘mRNA与蛋白的表达水平,充分利用转录组和蛋白质组研究的差异性和互补性,对基因的表达水平进行全方位的衡量,以获得基因表达各个步骤表达和调控的全景图,发掘常规单个组学未能发现的新结果。全面探究生物体疾病机理,生长发育机制等。

    蛋白质组学与转录组学联合分析一般分析流程
    在这里插入图片描述
    主要分析内容

    • 定性关联分析
    • 共有基因分析
    • 转录组与蛋白组定量关联分析。
    • mRNA与蛋白表达趋势一致的基因pathway分析。
    • mRNA与蛋白表达趋势相反的基因pathway分析。
    • 蛋白表达无变化,对差异表达mRNA对应的基因进行pathway分析。
    • mRNA表达无变化,对差异表达蛋白对应的基因进行pathway分析。
    • 转录组与蛋白组表达模式分析。
    • 蛋白相互作用网络分析。

    应用示例

    人类结肠癌的蛋白基因组分析揭示了新的治疗机会

    Proteogenomic Analysis of Human Colon Cancer Reveals New Therapeutic Opportunities
    文章链接 https://www.sci-hub.ren/10.1016/j.cell.2019.03.030
    在这里插入图片描述
    蛋白组学与多组学联合分析,揭示Rb的磷酸化与结肠癌的进程密切相关并可作为治疗靶点
    在这里插入图片描述

    展开全文
  • 整洁转录组学的宣言、研讨会和教程。 所有这些都在进行中 整洁的转录组学宣言 本文档规定了tidybulk和tidysc所基于的 tidy 转录组学的原则。 这些原则符合。 使用易于理解、冗长、无行话和首字母缩略词的词汇。 ...
  • 空间转录组学(Spatial Transcriptomics)

    千次阅读 2021-12-27 21:38:05
    01、空间转录组技术的发展 近年来单细胞转录组测序技术的应用大大拓宽了人们的视野,使人们能够深入了解组织中细胞的构成的多样性和基因表达状态。众所周知,基因表达具有时间和空间的特异性,通过对不同时间点的...

    01、空间转录组技术的发展
    近年来单细胞转录组测序技术的应用大大拓宽了人们的视野,使人们能够深入了解组织中细胞的构成的多样性和基因表达状态。众所周知,基因表达具有时间和空间的特异性,通过对不同时间点的样本取材,使用单细胞转录组测序技术能够解析时间维度上细胞类型和基因表达的变化过程。

    图1. 早期胚胎发育中基因表达的时间特异性【1】

    然而单细胞测序实验的前提是组织必须通过机械分离或酶解消化成单细胞悬液,此过程不可避免的丢失了组织中细胞所处的原始位置信息,也导致了细胞间的通讯网络被打破,这使我们难以获得组织中不同区域的细胞构成和基因表达状态,以及不同功能区之间的基因差异表达等信息。

    图2. 单细胞转录组测序技术和空间转录组技术【2】

    单细胞转录组测序技术可以说是融合了高通量组学技术和传统的单细胞研究手段,即解决了通量和分辨率的问题。空间转录组技术(spatial transcriptomics)则需要利用常规的原位技术和组学技术两方面的优势。

    图3. 单细胞测序技术解决了通量和分辨率的问题

    现有的空间转录组技术主要分为两类:一类是基于杂交和成像的方法,例如smFISH,Branched FISH;另一类是基于测序的方法,包括TIVA,ISS,FISSEQ等。smFISH,Branched FISH等靶向方法在分析的细胞数量和检测靶点的数量上都受到限制。而上述基于测序的方法虽然是可作为非靶向的筛选手段,但能够分析的细胞数量仍处在较低水平。

    图4. 空间转录组技术的比较【3】

    今年一项大受关注的研究成果,来自于中国科学院上海生命科学研究院,该研究利用一种称为Geo-seq的技术,整合激光显微切割技术和微量RNA-seq技术,重建了小鼠不同发育时期的三维空间转录组图谱【4】。其实该技术的第一篇文章发表于2016年,绘制了小鼠早期胚胎原肠运动中期(E7.0 late mid-streak stage)精细的三维分子图谱,揭示了小鼠细胞谱系建立过程中的空间转录组特征、转录因子和信号通路调控网络【5】。然而该技术的工作量十分巨大,首先需要将胚胎进行连续切片,之后再利用LCM将每一个切片分成4~6个区域,每个区域的微量组织再分别进行RNA抽提,微量RNA扩增、建库和测序的流程【6】。

    图5. Geo-seq技术的原理

    2016年,另一项发表在Science上的工作,则利用基因芯片技术将位置信息保留在芯片上,再利用二代测序技术对组织中的RNA进行测序,从而生成了组织切片上完整的基因表达图像【7】。

    图6. 空间转录组测序技术的原理

    该论文的通讯作者Joakim Lundeberg也是瑞典Spatial Transcriptomics公司的联合创始人之一,2018年底10X Genomics宣布收购Spatial Transcriptomics,并于2019年发布Visium空间基因表达解决方案(Visium Spatial Gene Expression Solution)。

    02、10X Genomics Visium空间转录组技术
    1、技术原理

    将冰冻组织切片放置在10X Genomics Visium芯片的的捕获区域内,进行HE染色和成像后,对组织切片进行透化处理,细胞内的mRNA释放,从而被芯片上带有oligo-dT的探针捕获,并且每个探针都带有特异的地址序列,然后以mRNA为模版进行cDNA合成,构建文库后再通过测序,获得基因表达信息的同时,每一条测序reads因带有地址序列,从而能够获得基因表达的位置信息。

    图7. 10X Genomics Visium空间转录组技术的原理

    10X Genomics Visium芯片包含两种芯片,分别为组织优化芯片和基因表达芯片,组织优化芯片用来摸索组织透化的条件,基因表达芯片用来进行正式样本的空间转录组实验。其中基因表达芯片上有4个捕获区域,每个区域大小为6.5mm *6.5mm,每个捕获区域中有5000个带有特异地址序列的探针簇,称为barcoded spots,每个spot直径为55um,包含数百万个用于捕获的oligo探针序列,相邻两个spot点的中心距离为100um。探针序列的结构为:测序引物结合序列,16nt的地址序列,12nt的UMI序列以及30nt的oligo-dT序列。

    图8. 10X Genomics Visium空间转录组芯片的结构

    2、实验流程

    (1)新鲜组织样本进行异戊烷固定、液氮速冻和OCT包埋;

    (2)用冷冻切片机进行切片;

    图9. 样本准备和切片

    (3)准备5~10张切片提取RNA并进行质量评估(要求RIN值>7.0);

    (4)透化条件优化。组织优化玻片包含8个捕获区域,其中6个区域分别设置6个不同的透化时间,另外两个区域1个为不加透化剂的阴性对照,另1个为阳性对照,不放组织切片,而是直接加入RNA。其实验流程为:固定→染色→明场拍照→组织透化→荧光cDNA合成→组织移除→荧光扫描,根据荧光强度判断最优的透化时间。

    (5)正式实验。正式实验用的基因表达芯片上有4个捕获区域,其实验流程为:染色以及明场拍照→组织透化(用上述优化好的透化时间进行)及cDNA合成→文库构建→高通量测序。

    图10. 10X Genomics Visium空间转录组技术的流程

    3、应用方向

    空间转录组的应用方向包含了肿瘤学,免疫学,发育生物学,神经科学及病理学等各个方向。

    图11. 空间转录组技术的应用方向

    4、数据分析

    空间转录组数据分析的核心是根据每个芯片上每个spot的基因表达信息进行聚类,然后将spot根据地址序列放回到组织的图像上,同时可以对每个gene在组织上表达的空间位置进行定位。

    图12. Spot聚类和图像整合

    图13. 基因表达的空间热图【8】

    5、空间转录组和单细胞转录组数据的整合

    10X Genomics Visium空间转录组技术目前还达不到单细胞分辨率,而单细胞转录组数据则能够起到一定的补充作用,将两者的数据进行锚定和整合,使我们能够获得目标组织的三维空间转录组图谱。

    图14. 空间转录组和单细胞转录组数据的整合

    展开全文
  • 10X 空间转录组学

    2022-03-13 11:01:01
    10X 空间转录组学(待补充)

    空转Spatial Transcriptomics:将基因表达与组织切片的免疫组化图片结合,将组织内不同细胞的基因表达信息定位到组织空间,直观地检测组织不同部位基因表达的差异

    一、基本流程及原理

    1、基本原理:基因表达芯片上有4个捕获区域,每个捕获区域约有5000个spot,每个spot直径55µm,两个spot中心点间距100µm,一个spot上有数百万条oligo且Spatial Barcode相同,不同spot间Spatial Barcode不同,通过Spatial Barcode就能知道mRNA的空间位置信息。UMI用于基因表达定量,知道每个spot上有哪些基因表达及其表达量。

    基本流程 :将冰冻切片放在芯片捕获区域内,经HE染色、成像后,对组织进行透化、释放胞内mRNA,被芯片上oligo-dT探针捕获,每个探针都带有特异的地址序列,再以mRNA为模版进行cDNA合成、构建文库,测序获得基因表达及位置。

     2、芯片及探针结构

    3、样本准备★★

        a、需要术后新鲜组织样本,石蜡包埋、液氮冷冻、-80℃冻存标本不可用

        b、冷冻:异戊烷液氮冷冻

        c、OCT包埋:注意标明组织及包埋盒方向 

        d、切片及质控

         e、透化优化

         f、正式实验

    2、初步统计及质控

    二、空转分析

    1、降维聚类:PCA,t-SNE,UMAP,基因表达及mRNA表达分布图

     

     

    2、差异表达分析:相关性热图,PCA图,表达差异热图、气泡图、t-SNE、小提琴图、空转验证

     

    3、数据库分析:GO,KEGG,DisGeNET,PPI

     

    4、结合10X 单细胞:将10X 单细胞判断出的细胞种类、表达值与空转spot中表达值比较,判断spot中主要细胞是什么

     

    三、运用例:空间转录组应用领域与研究思路 - 简书 (jianshu.com)

    1、 

     

    资料来源:

    1、【单细胞测序6】空间转录组学介绍-欧易生物_哔哩哔哩_bilibili

    2、10x Visium空间转录组分析思路_哔哩哔哩_bilibili

    展开全文
  • 转录组学实践实验室 这项工作是根据 . 这意味着您可以复制、共享和修改作品,只要结果是在同一许可下分发的。 本教程由 Mobolaji Adeolu (), John Parkinson () & Xuejian Xiong () 制作 概述 本教程将带您了解...
  • Patch-seq 是一种强大的技术,可以对单个神经元进行多模式表征——电生理学、形态学和转录组学。 在艾伦研究所,我们优化了这项技术以有效收集高质量数据。 在此 GitHub 存储库中,我们提供了描述此优化技术和相关...
  • 基于高通量测序数据的转录组学综合分析软件集中了现代化管理思想与计算机技术为一体,能够对生物基因进行测序分析管理,可将测序结果分析通过计算机展示,有助于提高生物转录组学工作中的各个环节全面化质量管理,在...
  • 转录组学带到tidyverse! 该代码是根据GNU通用公共许可证的版本3发布的。 网址: 请也看看 用于批量数据的整洁表示 用于单细胞数据的整洁表示 用于单细胞数据的整洁表示 用于通过整洁的原理分析和操作生成的热图 ...
  • MUFFIN是混合装配和差分装箱工作流程,用于宏基因组学,转录组学和途径分析。 如果您在研究中使用MUFFIN,请引用 该文档位于 指数 : : 用法: 自动使用 基本用法 进阶用法 故障排除 选项 完整的帮助和选项 参考...
  • 空间转录组学是新兴的技术堆栈,它为传统的单细胞RNA测序增加了空间维度。 基于原位测序或多重RNA荧光原位杂交的新方案可记录单个分子在固定组织切片中的位置。 但是,在单个细胞级别分析此类数据需要准确识别细胞...
  • 转录组学研究方法

    2013-11-21 15:08:38
    转录组学基本研究方法 概念 基于测序的转录组学方法 EST 全长cDNA文库 生物信息学分析 基于杂交的转录组学方法 基因芯片 生物信息学分析
  • 棉花功能基因组学平台构建和非编码转录组学数据挖掘.pdf
  • 转录组学transcriptomicswxjPPT课件.pptx
  • 浙江大学出版社印刷出版了北京基因组研究所(国家生物信息中心)合作著作的生命科学著作《RNA 甲基化表观转录组学》,该著作入选“中国基础研究前沿”丛书。 表观遗传学修饰包括DNA、RNA和...
  • 转录组学的研究

    2019-11-21 15:43:47
    使用高通量测序技术对物种的转录组进行研究,具有以下优点: 1.灵敏度高,可以对痕量RNA进行检测和定量; 2.可以获得转录本全长,不但利于进行更准确的定量分析,而且可以发掘新转录本形式及插入/缺失突变; 3....
  • i次IN的tegration多组学d ATA选自S英格尔有丝测序技术)是R包单细胞的多组学整合分析,开发和在MDACC维持。 bindSC的开发是为了解决单细胞多组学数据集成的挑战,该数据集成由未配对的细胞组成,这些细胞具有跨模态...
  • 转录组学研究技术及其应用PPT学习教案.pptx
  • 表观遗传特别是DNA修饰的研究已成为后基因时代生命科学领域关注的热点。近年来,随着康奈尔大学第一篇RNA腺苷N6位置甲基化(m6A)图谱的绘制及其在mRNA普遍存在的发现,转录修饰这一未开垦的学术领域,逐渐成为...
  • 为进一步提高《微生物实验手册》稿件质量,本项目新增大众评审环节。文章在通过同行评审后,采用公众号推送方式分享全文,任何人均可在线提交修改意见。公众号格式显示略有问题,建议电脑端点击文末...
  • 使用 stringtie 和其他工具使用长读取转录组学数据注释基因组的管道 这条snakemake管道从牛津纳米Kong cDNA 或直接 RNA 读取创建 GFF 注释。 cDNA 读数可选地由处理以进行修剪和定向。 使用将处理后的读数映射到参考...
  • 三代测序让基因组学、转录组学研究别开生面 SMRT 技术原理 单分子实时测序(Single Molecule Real-Time,SMRT)技术建立在零模波导孔(Zero-Mode Wavegu-ides,ZMWs)和荧光标记核苷酸3′端磷酸(利于维持 DNA 链...
  • 基于高通量测序454 GS FLX 的丹参转录组学研究
  • 转录组学主要技术和应用研究.doc
  • 通过转录组学和代谢组学数据整合解决基因React关系的通量预测和基于网络的方法 对应刊物 通过基于网络的多组学整合阐明人乳寡糖生物合成基因 Benjamin P. Kellman、Anne Richelle、Jeong-Yeh Yang、Digantkumar ...
  • 转录组学主要技术及其应用研究报告.doc

空空如也

空空如也

1 2 3 4 5 ... 20
收藏数 7,479
精华内容 2,991
关键字:

转录组学